Laktoperoksidaz Enziminin Farklı Kaynaklardan Saflaştırılması: Kapsaisin ve Pirogallol’ün İnhibisyon Profili

Abstract

Peroksidazlar (POD), gıda ve ilaç endüstrisi başta olmak üzere metabolik fonksiyonlar, enzimatikreaksiyonlar ve klinik teşhislerde önemli kullanım alanına sahiptirler. Memeli POD enzimlerinden laktoperoksidaz(LPO) süt, tükrük ve gözyaşında (hidrojen peroksit oksidoredüktaz E.C 1.11.1.7) lokalize olurken, miyeloperoksidazlökositler ve trombositlerde lokalizedir. LPO enzimi hidrojen peroksit eşliğinde tiyosiyanatın antibakteriyelözelliklere sahip hipotiyosiyanata dönüşümünü katalizler. Bu çalışmanın amacı, farklı memeli (Sığır, manda, koyunve keçi) sütlerinden saflaştırılmış LPO enzimi üzerine kapsaisin ve pirogallolün in vitro etkilerini belirlemektir.Kapsaisin ve pirogallolün LPO enzimi üzerindeki inhibisyon etkisini belirlemek için herbir memeli sütündenLPO enzimi saflaştırıldı, daha sonra, enzim aktiviteleri ölçülerek herbir inhibitör için Lineweaver-Burk grafikleriçizildi; Ki sabiti ve inhibisyon tipleri bu çizilen grafiklerden hesaplandı. Kapsaisin ve pirogallolün Ki değerleri0.0035-36.178 ?M aralığında bulundu. Pirogallol, en etkili inhibitör özelliğini yarışmasız inhibisyon tipi ile koyunsütünden saflaştırılmış LPO enzimi üzerine 0.0035 ± 0.0012 ?M Ki değeri ile göstermiştir.